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【技术分享】沙门氏菌血清分型技术介绍

2022-04-29 08:59浏览量:450

沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性致病菌,寄生在人类和动物肠道中,根据Kauffman-White(K-W)血清型分型方法,基于沙门氏菌菌体抗原及鞭毛抗原的差异,可分为2579种沙门氏菌血清型[1]。


其中部分血清型,如肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌等,能够使宿主产生呕吐、腹泻等多种食源性疾病症状[2,3]。据估计,每年因沙门氏菌感染而引起的食物中毒事件占食源性疾病的70%~80%[4]。


对此,世卫组织(WHO)在2000年创立了全球范围内的沙门氏菌监测网,在世界范围内,对沙门氏菌等食源性致病菌进行监测和防控[5]。沙门氏菌血清分型在常规监测、病原学检测及菌株溯源中有着重要作用,具有重要的公共卫生学意义。


#针对沙门氏菌血清分型,有以下几种方法#


传统血清凝集法

噬菌体分型法

聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术

脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis,PFGE)

全基因组测序等。


聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)技术目前已被广泛应用在微生物鉴定中,人们通过对沙门氏菌不同血清型的基因序列分析,找出不同血清型的特异性编码基因,设计引物探针,在核酸水平上对菌株进行鉴定及分型。该方法操作高效便捷,用时较短,仅数小时即可得出结果,且结果判读清晰简单,只要有分子生物学基础的实验人员均可使用,对仪器耗材等要求也不高。


同时,一些沙门氏菌由于自凝集及培养状态无法用血清凝集的方式有效分型[5],而PCR检测的方式不受细菌状态的影响,一定程度上弥补了传统方法的不足,满足了快速检测的需求。


目前已有不少研究人员开始尝试用PCR法进行沙门氏菌血清分型,周燕霞等2019年对33+6株沙门氏菌进行传统的玻片血清凝集分型和分子血清分型试剂盒两种方法的对比试验,结果显示两种方法匹配率高达94.9%(37/39)[6]。


MicroFast®沙门氏菌血清型分子鉴定解决方案


第一代产品以12个特异性基因组合以及大数据统计结果为基础,建立数据库,进行血清分型。


第二代产品以沙门氏菌特异性血清抗原基因(O/H)为基础,进行血清分型。


MicroFast®一代沙门氏菌血清型分子鉴定试剂盒数据库包括128种血清型。

MicroFast®二代沙门氏菌血清(O、H)基因分型数据库

解决方案涵盖:


沙门氏菌血清型分子鉴定试剂盒(PCR-探针法)


沙门氏菌血清(O、H)基因分型试剂盒(PCR-探针法)


沙门氏菌单相(二项缺失)鉴定试剂盒(PCR-探针法)


肠炎沙门氏菌鉴定试剂盒(PCR-探针法)


鼠伤寒沙门氏菌鉴定试剂盒(PCR-探针法)


鼠伤寒沙门氏菌/鼠伤寒沙门氏菌单相变种鉴定试剂盒(PCR-探针法)


参考文献:

[1] Majowicz S E, Jennie M, Elaine S, et al. The Global Burden of Nontyphoidal Salmonella Gastroenteritis[J]. Clinical Infectious Diseases, 2010, 50(6):882.

[2] 王茂起, 冉陆, 王竹天,等. 2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究[J]. 卫生研究, 2004, 33(1):49-49.

[3] Xia S, Hendriksen R S, Xie Z, et al. Molecular Characterization and Antimicrobial Susceptibility of Salmonella Isolates from Infections in Humans in Henan Province, China[J]. Journal of Clinical Microbiology, 2009, 47(2):401-409.

[4] 杨保伟,申进玲,席美丽,等.2007-2008年西安地区鸡肉源沙门氏菌相关特性分析[J].食品科学,2011,32(19):130-136

[5] 胡豫杰,赫英英,王晔茹,刘畅,王美美等. 中国六省份零售整鸡中沙门菌血清型分布和耐药性特征研究. 中华预防医学杂志. 2018,52(04)

[6] 周燕霞, 蔡雪凤, 任岩,等.沙门氏菌传统血清凝集分型和分子血清分型试剂盒方法比较[J]. 食品安全质量检测学报, 2019, 010(018):6068-6077.